一、檢測卡原理
豬藍耳膠體金檢測卡采用免疫膠體金層析技術制成,可快速檢測豬中的豬衣原體病毒抗體。將豬衣原體病毒抗原包被在硝酸纖維素膜的檢測線(T)上,抗豬衣原體病毒抗體包被在硝酸纖維素膜的質控線(C)上,用膠體金標記的豬衣原體病毒抗原干燥后置于玻璃纖維素膜下端。當加入加樣孔內,由于層析的原理,開始沿紙條移動,當遇上干燥的金標抗原,將其溶解,并帶著金標抗原繼續往上移動,至硝酸纖維素膜的檢測線。
如果樣品中有豬衣原體病毒抗體存在時,包被在檢測線上的豬衣原體病毒抗原和金標豬衣原體病毒抗原與樣品中的豬衣原體病毒抗體將會在檢測線上形成一個夾心的免疫復合物,呈一條紫紅色線,判定為陽性。樣品中的抗體效價越高,色線顏色越深。
如果樣品中沒有豬衣原體病毒抗體,檢測線(T)上沒有色帶出現,判定為陰性。樣品和金標抗原繼續往上移至質控線時,此處的抗豬衣原體病毒抗體將會同金標豬衣原體病毒抗原結合,在質控線(C)上形成一條紫紅色線,證明本檢測試劑有效。
二、適用范圍:本產品用于檢測豬血漿中豬衣原體病毒抗體,可用于豬衣原體病毒疫苗免疫效果評價。
三、包裝規格:50T/盒
四、儲存及有效期 保存于干燥陰涼處(2-30℃),保質期24個月。
操作步驟
一、血清制備
按常規方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中,靜置0.5-1小時待血液凝固后于4000轉/分鐘離心10分鐘(也可將血液靜置1-2小時,待血液凝固自然析出),分離。要求清亮,無溶血、無污染。樣品短期可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
二、操作方法
1.在檢測卡的加樣孔內加入2滴(約80ul)待檢樣品。
2. 將檢測卡平放于桌面上,在室溫下靜置5-20分鐘內判定結果,超過20分鐘的結果只能作為參考。
三、注意事項
1.檢測前請仔細閱讀說明書,本產品提供的各種試劑僅供本實驗用;
2.檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開,打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后檢測卡將失效;
3.待檢樣品應新鮮清亮,溶血或腐敗的樣品不可用于檢測;
4.實驗的廢棄物應按污染物處理規定妥善處理。
一、結果判斷
1. 陰性:在觀察孔內,只有對照線區(C)出現一條紫紅色線。
2. 陽性:在觀察孔內,檢測線區(T)及對照線區(C)同時出現紫紅色線??贵w滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3. 弱陽性:在觀察孔內,檢測線區(T)及對照線區(C)同時出現紫紅色線,但檢測線區(T)出現的顏色很淺。
4. 失效:在觀察孔內,對照線區(C)和檢測線區(T)都不出現色線;或僅檢測線區(T)出現色線。
二、診斷參考
1.如果該豬未接種過豬衣原體病毒疫苗:
a) 當被檢樣品檢測線(T)處無明顯色帶出現,說明被檢測樣品中沒有豬衣原體病毒抗體。如果豬群健康,應當及時進行豬衣原體病毒疫苗接種。
b) 當被檢樣品檢測線(T)處有明顯色帶出現,則該豬有可能為野毒感染,應進一步觀察驗證。
2.如果該豬已接種過豬衣原體病毒疫苗:
c) 當被檢樣品檢測線(T)條帶的色澤≥對照卡中1:40效價時,說明豬衣原體病毒抗體的滴度較高,已達到抵御強度攻擊的保護水平。
b) 當被檢樣品檢測線(T)條帶的色澤<對照卡中1:40效價時,說明豬衣原體病毒抗體效價未達到抵御豬衣原體病毒強度攻擊的最低保護滴度,建議進行疫苗補種。